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	<title>molezz BAR 世界尽头 &#187; H1N1</title>
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	<description>a man can be destroyed but not defeated -- 生物技术和计算机技术</description>
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		<title>甲型H1N1病毒检测试剂盒分析解释</title>
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		<pubDate>Mon, 04 May 2009 12:11:38 +0000</pubDate>
		<dc:creator>molezz</dc:creator>
				<category><![CDATA[生命科学|biology]]></category>
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		<category><![CDATA[检测]]></category>

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		<description><![CDATA[昨天中国宣布成功研制出猪感染甲型H1N1病毒检测试剂盒,由于我是学生物的,于是就好好看了一遍,不过由于主攻方向不是这方面,所以只是以自己所学来解释分析这个试剂盒. 试剂盒理论上应该分为以下几个部分: 1.组织RNA的提取(病毒的遗传物质是RNA,而不是DNA) 2.RNA的纯化 3.RNA的反转录(RT-PCR) 4.PCR鉴定 新闻中提到&#8221;适用于检测猪组织、分泌物和培养物的甲型H1N1病毒核酸，应用该方法可在5小时内获得检测结果&#8221;。我就大致解释下这方面的时间 1.由于是检测猪组织分泌物和培养物,所以首先可以利用trizol进行RNA的提取.具体方法类似于 利用Trizol提取植物组织RNA ,这一步骤视材料多少大约需要40分钟到60分钟 2.由于提取的组织RNA中含有DNA组分,为了避免对结果产生影响,一般需要进行DNA酶解去除步骤,如果量大,则需要氯化锂沉淀纯化.考虑到试剂盒是快速检测,一般可能只是进行DNA酶处理去除DNA,方法类似于promega试剂盒,此过程大约需要50分钟到60分钟 3.RNA的反转录(RT-PCR),即将RNA反转录成DNA,方法参考fermentasRT-PCR试剂盒,此过程大约需要80分钟到90分钟 4.最后就是将得到的DNA进行PCR扩增,利用琼脂胶查看是否有H1N1的特异性条带.根据检测片段的长度,此过程时间最长,基本需要2小时到3小时. 综合算来,如果顺利的话基本能在5小时得到结果. 大致解释下,如果有错,多多交流~~~]]></description>
			<content:encoded><![CDATA[<p><a href="http://pic.yupoo.com/molezzorg/575947625098/emq798vg.jpg"><img src="http://pic.yupoo.com/molezzorg/575947625098/emq798vg.jpg" style="DISPLAY: inline; FLOAT: right" height="84" alt="emq798vg[1].jpg" width="136"/></a> 昨天<a href="http://www.agri.gov.cn/xxlb/t20090503_1265308.htm" target="_blank">中国宣布成功研制出猪感染甲型H1N1病毒检测试剂盒</a>,由于我是学生物的,于是就好好看了一遍,不过由于主攻方向不是这方面,所以只是以自己所学来解释分析这个试剂盒.</p>
<p>试剂盒理论上应该分为以下几个部分: <br/>1.组织RNA的提取(病毒的遗传物质是RNA,而不是DNA) <br/>2.RNA的纯化 <br/>3.RNA的反转录(RT-PCR) <br/>4.<a href="http://www.biox.cn/content/20050527/14098.htm" target="_blank">PCR</a>鉴定</p>
<p>新闻中提到&#8221;<span style="FONT-WEIGHT: normal">适用于检测猪组织、分泌物和培养物的甲型H1N1病毒核酸，应用该方法可在5小时内获得检测结果&#8221;。我就大致解释下这方面的时间</span></p>
<p><span style="FONT-WEIGHT: normal">1.由于是检测猪组织分泌物和培养物,所以首先可以利用trizol进行RNA的提取.具体方法类似于 <a href="http://blog.molezz.org/read.php?117" target="_blank"><span style="FONT-WEIGHT: normal">利用Trizol提取植物组织RNA</span></a> ,这一步骤视材料多少大约需要40分钟到60分钟 <br/>2.由于提取的组织RNA中含有DNA组分,为了避免对结果产生影响,一般需要进行DNA酶解去除步骤,如果量大,则需要氯化锂沉淀纯化.考虑到试剂盒是快速检测,一般可能只是进行DNA酶处理去除DNA,方法类似于<a href="http://blog.molezz.org/read.php?112" target="_blank">promega试剂盒</a>,此过程大约需要50分钟到60分钟 <br/>3.RNA的反转录(RT-PCR),即将RNA反转录成DNA,方法参考<a href="http://www.fermentas.com/catalog/kits/kitrevertftstrand.htm" target="_blank">fermentasRT-PCR试剂盒</a>,此过程大约需要80分钟到90分钟 <br/>4.最后就是将得到的DNA进行PCR扩增,利用琼脂胶查看是否有H1N1的特异性条带.根据检测片段的长度,此过程时间最长,基本需要2小时到3小时.</span></p>
<p><span style="FONT-WEIGHT: normal">综合算来,如果顺利的话基本能在5小时得到结果.</span> <br/>大致解释下,如果有错,多多交流~~~</p>
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